Eén van de pareltjes van Damme en tevens één van de oudste gebouwen is het Sint-Janshospitaal. Het werd voor 1249 opgericht door de Dammenaars nadat ze hiervoor toestemming gekregen hadden van Margareta van Constantinopel. Het diende voor de opvang van zieken, armen en reizigers. Het hospitaal haalde haar inkomsten uit een belasting die geheven werd op de invoer van wijn. Vandaag de dag is er een bejaardentehuis in gevestigd.
Het centrale deel is nog uit 1249 en vertoont grote gelijkenissen met dit van het Sint-Janshospitaal van Brugge. De eeuwenoude kapel en ziekenzaal zijn nog steeds authentiek. In het gebouw werd in 1901 een prachtig museum ingericht met vele waardevolle stukken. Niet alleen verscheidene meubelen, schilderijen en religieuze voorwerpen behoren er tot de kunstschatten, maar ook eeuwenoud huisraad, munten, zegels, middeleeuwse grafzerken, glasramen, boeken, porselein...